Folículo-Injeção estabilizadora 344 (Follistatin 344) 1 mg/frasco: principais recursos
Proteína-de ligação à ativina|Regulador positivo de crescimento muscular 1mg/frasco
Nome genérico: Hormônio-estimulante folículo 344
Nome inglês: Folistatina 344
Estrutura proteica: Proteína recombinante, uma isoforma de folistatina com 344 aminoácidos.
Peso molecular: Aproximadamente 38-42 kDa (após glicosilação)
Pureza: Maior ou igual a 90% (SDS-PÁGINA/HPLC)
Contente: 1mg/garrafa
Aparência: Pó liofilizado-branco ou esbranquiçado
Armazenar: Congelar a -80 graus, proteger da luz e armazenar em local seco.
Guia de uso e armazenamento
Folistatina 344:
A-estafilina 344 folicular é uma glicoproteína de ocorrência natural cuja principal função é ser uma proteína de ligação de alta-afinidade e neutralizadora de fatores de crescimento transformadores- membros da superfamília, como ativina e miostatina. Ao se ligar a esses ligantes, a -estafilina 344 do folículo bloqueia efetivamente sua interação com os receptores da superfície celular, aliviando assim os sinais regulatórios negativos sobre o crescimento muscular. Em modelos experimentais, este efeito inibitório promove significativamente a proliferação e diferenciação de células musculares esqueléticas, aumentando em última análise a massa muscular. Em comparação com a injeção direta de fatores de crescimento, a -estafilina 344 do folículo exerce seus efeitos modulando a rede de sinalização endógena, fornecendo uma ferramenta única para estudar os mecanismos de hipertrofia muscular, tratar a atrofia muscular e explorar a regulação metabólica.
Devido ao seu papel fundamental na via reguladora do crescimento muscular, a folistatina 344 é amplamente utilizada em biologia muscular, medicina esportiva, doenças neuromusculares (como distrofia muscular) e pesquisas sobre caquexia. Em comparação com inibidores direcionados a um único ligante (como anticorpos anti{2}}miosina), a folistatina 344 tem um espectro de ligação ao ligante mais amplo, tornando-a um agente de pesquisa mais abrangente para estudar a regulação global do crescimento e regeneração muscular, avaliar efeitos sinérgicos e explorar seu potencial terapêutico em modelos patológicos complexos (como distrofia muscular de Duchenne e caquexia oncológica).
Aplicação do hormônio-folículo estimulante 344:
Como uma proteína de ligação endógena multifuncional, é usada em modelos in vitro e in vivo para se ligar fortemente e neutralizar ligantes da superfamília TGF-, como ativina e miostatina, estudando assim os amplos efeitos do bloqueio dessa via na determinação do destino dos mioblastos, massa e função muscular esquelética e homeostase metabólica sistêmica. É usado principalmente para explorar estratégias de intervenção para doenças de atrofia muscular, reparo e aprimoramento muscular após lesão e interações metabólicas de gordura muscular.
Ele é usado rotineiramente em modelos de camundongos com distrofia muscular de Duchenne, experimentos de regeneração muscular, estudos de sarcopenia relacionada à idade e pesquisas pré-clínicas que avaliam estratégias para promover a hipertrofia muscular. Sua forma de proteína recombinante padronizada fornece uma ferramenta de pesquisa crucial e confiável para validar hipóteses terapêuticas direcionadas à sinalização da superfamília TGF- em doenças musculares e metabólicas relacionadas sob condições estritamente controladas.
Métodos de uso e armazenamento
1. Reconstituição e preparação:
Solvente recomendado:
Solvente preferido: água estéril para injeçãooutampão fosfato estéril em pH 6,0-7,4. Evite usar solventes com valores de pH extremos.
Porta-chaves: Proteína transportadora deve ser adicionadaà reconstituição e a todas as soluções de diluição.Recomenda-se PBS estéril contendo 0,1%-1% de albumina de soro bovinopara minimizar a adsorção superficial e a ligação inespecífica.
Diluição da solução de trabalho: Diluir comPBS estéril ou meio de cultura celular contendo a mesma concentração de proteína transportadora para garantir condições de solução consistentes.
Aviso importante: Não use água pura ou solução tampão sem proteínas transportadoras para dissolver diretamente. Não agite em vórtex, agite violentamente ou congele e descongele repetidamente.
Procedimento de preparação padrão:
Preparação de solvente:
Use PBS (pH 7,2-7,4) ou água estéril para injeção que foi filtrada estéril através de uma membrana de filtro de 0,22 μm.
Adicione BSA livre de protease e ácidos graxos ao solvente para atingir uma concentração final de 0,1%-1%.
Recomenda-se que os solventes sejam pré-resfriados em gelo ou preparados na hora em temperatura ambiente.
Procedimento de reconstituição:
Execute o procedimento em uma bancada limpa. Adicione 1,0 mL de solvente de proteína transportadora pré-resfriado a um frasco de 1 mg.
Deixe o solventefluir pela parede da garrafa muito lentamentepara garantir a saturação completa do bolo-liofilizado eevitar impacto direto.
Coloque o frasco no gelo ou a 4 graus edeixe dissolver naturalmente por 15-30 minutos. Durante esse tempo, você podemuito lenta e suavemente incline e gireo frasco várias vezes para ajudar na dissolução.Não agite em vórtex, agite ou agite violentamente.
Concentração final: solução estoque de 1 mg/mL.
Dispensação e diluição gradiente:
Depois de completamente dissolvido, distribua imediatamente em doses-de uso único de 5-20 μL usando tubos de centrífuga silanizados de baixa adsorção em gelo.
Ao diluir, use PBS ou meio de cultura contendo a mesma concentração de proteína transportadora paradiluição gradientepara evitar diluição em grande-escala em uma única etapa.
Rotulagem clara: Follistatin 344, concentração, concentração de proteína transportadora, data de preparação, número de lote.
Referência de concentração de trabalho:
Experimentos celulares in vitro: A faixa de concentração comumente usada é de 0,1 a 5 ug/mL. A concentração específica precisa ser otimizada através de experimentos preliminares baseados no tipo de célula (como mioblastos C2C12) e na finalidade experimental (proliferação, diferenciação).
Experimentos com animais in vivo: A dosagem deve ser estritamente determinada com base na literatura publicada sobre o modelo animal específico. As vias comuns de administração são injeção intraperitoneal, subcutânea ou intramuscular, com faixas de dosagem tipicamente de ug/kg a mg/kg.A dosagem precisa deve ser determinada com base em resultados experimentais preliminares e requisitos de ética animal.
Exemplo de cálculo: Para preparar uma solução de trabalho de 100 ng/mL, pegue 1 μL da solução estoque de 1 mg/mL e adicione-o a 1 mL de meio contendo 0,1% de BSA para obter uma solução intermediária de 1 ug/mL. Em seguida, pegue 100 μL da solução intermediária e adicione-os a 900 μL de meio.
Pontos-chave a serem observados:
Proteínas transportadoras são essenciais: soluções sem proteínas transportadoras podem levar a uma perda significativa de proteínas devido à adsorção e podem causar agregação.
Extremamente gentil: Todas as operações devem evitar a geração de bolhas, espuma ou forças de cisalhamentopara prevenir alterações conformacionais e inativação de proteínas.
Dissolução natural: Aguarde tempo suficiente para que a proteína se dissolva naturalmente; se necessário, pode ser colocado a 4 graus durante a noite para dissolução lenta.
Ciclos repetidos de congelamento-degelo são estritamente proibidos: Cada frasco é para uso único somente após a dispensaçãoe ciclos repetidos de congelamento-degelo são estritamente proibidos. A solução de trabalho diluída deve ser preparada e utilizada imediatamente.
Estado da solução: Após a reconstituição, a solução deve ser límpida, incolor ou amarelo pálido. A presença de qualquer material floculento, turbidez ou partículas visíveis indica que a proteína pode estar agregada ou degradada e a solução deve ser descartada.
2. Condições de armazenamento:
Pó liofilizado não reconstituído:
Armazenamento-de longo prazo: -80 graus (congelamento profundo). Isso éa únicacondição recomendada para manter a estabilidade-de longo prazo.
Prazo de validade: Sob condições de -80 graus e proteção da luz e da secura, o prazo de validade é geralmente de 12 meses.
Proteja estritamente da luz e da umidade: Armazene no saco de papel alumínio-à prova de luz original e certifique-se de que o dessecante-incorporado seja eficaz.
Solução reconstituída:
Imediatamente aliquotar e congelar: Após o descongelamento, o processo deve ser realizado em gelo e a alíquota deve ser concluídadentro de 30 minutos.
Reembalar e congelar: Armazenar imediatamente a -80 grausapós reembalagem. Recomenda-se usar dentro de um mês. O armazenamento a -20 graus não é recomendado.
Solução de trabalho: A solução de trabalho diluídanão deve ser armazenado. Deve ser mantido em gelo e consumido em até 4 horas após o preparo.
Condições de transporte:
deve ser transportadosobgelo seco(-78 graus) condições para garantir que não descongele durante todo o processo.
A embalagem de transporte deve incluir gelo seco suficiente, caixas isoladas e dispositivos de monitoramento de temperatura.
3. Estabilidade e Padrões de Processamento:
Estabilidade físico-química:
É mais estável em pH quase{0}neutro (6,0-7,5) e em tampão isotônico contendo proteínas transportadoras.
É extremamente sensívelao estresse mecânico (vórtice, oscilação, borbulhamento), ciclos repetidos de congelamento-degelo e adsorção superficial .
Evite o contato com ácidos fortes, álcalis fortes, detergentes e oxidantes.
Manter a bioatividade:
Adesão estrita aos princípios de "proteção da transportadora, manuseio cuidadoso, criopreservação profunda e uso único-"é fundamental para garantir a confiabilidade dos resultados da pesquisa.
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