GDF-8 1mg/vial promove significativamente a melhoria da massa muscular e da força

Introdução ao núcleo de GDF-8 1mg/garrafa

Miostatina|Fator de crescimento transformador- Membro da superfamília 1mg/frasco

Nome genérico: Miostatina (Fator de Diferenciação de Crescimento-8)

Nome inglês: Miostatina (Fator de Diferenciação de Crescimento 8, GDF-8)

Estrutura proteica: Os peptídeos maduros são homodímeros, com cada cadeia contendo aproximadamente 110 aminoácidos.

Peso molecular: Aproximadamente 25 kDa (forma monomérica)

Pureza: Maior ou igual a 90% (SDS-PÁGINA/HPLC)

Contente: 1mg/garrafa

Aparência: Pó liofilizado branco

Armazenar: Congelar a -80 graus, proteger da luz e armazenar em local seco.

Guia de uso e armazenamento

GDF-8 (miostatina):

GDF-8, um membro da superfamília do fator de crescimento transformador-, é expresso principalmente no músculo esquelético. Como regulador negativo do crescimento muscular, controla com precisão a massa muscular esquelética, ligando-se à via de sinalização do receptor de activina IIB/ALK4/5, inibindo a proliferação e diferenciação de mioblastos. Como uma proteína chave de sinalização de feedback negativo para o crescimento muscular, ela desempenha um papel central em modelos experimentais de desenvolvimento muscular, regeneração, atrofia (como caquexia oncológica e sarcopenia relacionada à idade) e doenças metabólicas. Comparadas aos fatores pró-anabolismo, suas características regulatórias negativas fornecem uma perspectiva única para a compreensão dos mecanismos de equilíbrio da homeostase muscular.

Devido ao seu papel regulador negativo crucial no crescimento muscular, o GDF-8 é amplamente utilizado por pesquisadores em biologia muscular, medicina regenerativa, fisiologia do exercício e doenças metabólicas. Em comparação com modelos de gene knockout, sua forma de proteína recombinante fornece uma ferramenta experimental padronizada para controlar com precisão a intensidade dos sinais inibitórios, estudando processos de dose-resposta e tempo in vitro e in vivo. Sua aplicação em estudos de distúrbios de regeneração muscular, modelos de atrofia muscular e pesquisas metabólicas relacionadas às interações músculo-gordura fornecem uma base para avaliar possíveis estratégias de intervenção direcionadas à via do GDF-8.

Aplicações GDF-8:

Como um regulador negativo clássico do crescimento muscular, é usado em modelos in vitro e in vivo para simular ou aumentar com precisão os sinais inibitórios do crescimento muscular, estudando assim seus efeitos inibitórios na proliferação, diferenciação, massa muscular esquelética e função de mioblastos. É usado principalmente para explorar os mecanismos moleculares de atrofia muscular, regeneração muscular prejudicada e as interações entre músculos e outros tecidos (como gordura e ossos).

É amplamente utilizado em modelos de atrofia muscular, estudos da função de células mioblásticas/satélites, experimentos de regeneração muscular e pesquisas sobre distúrbios metabólicos musculares relacionados à obesidade e diabetes. Sua forma padronizada de proteína recombinante fornece uma ferramenta de pesquisa essencial para avaliar novos medicamentos anti{1}}atrofia muscular, estudar a base molecular da adaptação ao exercício e explorar estratégias terapêuticas direcionadas à sinalização de GDF-8.

Métodos de uso e armazenamento

1. Reconstituição e preparação:

Solvente recomendado:

Solvente preferido: Diluir a solução de ácido acético com pH 4,0-5,0 (por exemplo, ácido acético 20 mM).

Porta-chaves: A proteína transportadora deve ser adicionadaao solvente e a todos os diluentes;recomenda-se uma solução estéril de ácido acético contendo 0,1% de albumina sérica bovina (BSA).

Diluição da solução de trabalho: Diluir até pH fisiológico comPBS estéril ou meio de cultura celular contendo 0,1-1% de BSA.

Absolutamente proibido: É estritamente proibido dissolver ou diluir diretamente a proteína usando água pura, PBS neutro ou soluções sem proteínas transportadoras,caso contrário, ocorrerá agregação, precipitação e inativação irreversíveis de proteínas.

Procedimento de preparação padrão:

Preparação de solvente:

Prepare uma solução de ácido acético estéril 20mM contendo 0,1% de BSA (ou proteína transportadora de maior pureza) e filtre-a através de uma membrana de filtro de 0,22μm.

O solvente precisa ser pré-resfriado em gelo antes do uso.

Procedimento de reconstituição:

Execute o procedimento no gelo. Adicione 1,0 mL de solvente de proteína transportadora ácida pré-refrigerada a um frasco de 1 mg.

Use uma micropipeta para injetar a amostra bem lentamente ao longo da parede do frasco, evitando a geração de bolhas de ar ou impacto direto no bolo-liofilizado.

Coloque o frasco no gelo egire suavemente horizontalmente por 5 a 10 minutosaté que o pó esteja completamente dissolvido.Não agite, agite, sopre ou agite violentamente.

Concentração final: solução estoque ácida de 1 mg/mL (aproximadamente 40 μM).

Dispensação e diluição gradiente:

Distribua imediatamente em doses únicas de 2-10 μL usando tubos de centrífuga silanizados de baixa adsorção em gelo.

Ao diluir, primeiro dilua a solução estoque ácida pelo menos 100 vezes com PBS ou meio de cultura contendo 0,1-1% de BSA para neutralizar o pH. Por exemplo, pegue 1 μL de solução estoque e adicione-o a 99 μL de PBS contendo 1% de BSA para obter uma solução intermediária de 10 ug/mL.

A solução intermediária é então diluída até a concentração final de trabalho. Todas as etapas de diluição são realizadas em gelo.

Claramente rotulado: GDF-8, concentração, pH, data de preparação, número de lote, temperatura de armazenamento.

Referência de concentração de trabalho:

Experimentos celulares in vitro: A faixa de concentração comumente usada é de 0,1 a 5 ug/mL (aproximadamente 4 a 200 nM), que precisa ser otimizada de acordo com o tipo de célula e a finalidade experimental.

Experimentos com animais in vivo: A dosagem deve ser determinada rigorosamente de acordo com o modelo e a via de administração (ex.: intraperitoneal, intramuscular, intravenosa) com base na literatura. A faixa comumente usada está na faixa de ug/kg a mg/kg, eexperimentos preliminares devem ser conduzidos.

Exemplo de cálculo: Para preparar uma solução de trabalho de 100 ng/mL, pegue 1 μL da solução intermediária de 10 ug/mL e adicione-o a 100 μL de meio de cultura.

Pontos-chave a serem observados:

Baixa temperatura e suavidade: Todo o processo deve ser realizado no gelo e os movimentos devem ser extremamente suavespara evitar a desnaturação das proteínas.

Dissolução ácida forçada: Deve ser dissolvido em uma solução tampão ácida (pH 4-5), o que é crucial para manter sua solubilidade e atividade.

Proteínas transportadoras forçadas: A dissolução e diluição devem ser realizadas utilizando soluções contendo proteínas transportadoras, como BSApara evitar adsorção e agregação.

Ciclo de congelamento-degelo estritamente proibido: Ciclos repetidos de congelamento-degelo são estritamente proibidos; a solução deve ser dispensada de uma só vez. Solução de trabalho diluídanão deve ser armazenado; deve ser preparado e usado imediatamente.

Observação da condição: Após a reconstituição, a solução deve estar límpida e ligeiramente opalescente. A presença de qualquer matéria floculenta, partículas ou turbidez indica que a proteína foi desnaturada e agregada e a solução deve ser descartada.

2. Condições de armazenamento:

Pó liofilizado não reconstituído:

Somente armazenamento: -80 graus (congelamento profundo). Não armazene a -20 graus.

Prazo de validade: 12 meses a -80 graus.

Proteja estritamente da luz: Guarde no saco original-de papel alumínio à prova de luz com um dessecante dentro.

Solução reconstituída:

Dispensação imediata:Dispensaçãodeve ser concluído em 5 minutosapós a reconstituição.

Reembalado e congelado: Só pode ser armazenado a -80 graus, prazo de validade máximo de 2 semanas, não recomendado para armazenamento.

O armazenamento é estritamente proibido: A solução de trabalho diluída devenão ser armazenadoe deve ser mantido em gelo e usado dentro de 4 horas.

Condições de transporte:

Deve ser transportadosobgelo seco(-78 graus) condições.

A embalagem deve ter gelo seco e isolamento suficiente para garantir que não descongele durante o processo.

3. Estabilidade e Padrões de Processamento:

Estabilidade físico-química:

É sensível ao pH esó é estável e solúvel em pH ácido (4,0-5,0). Agrega-se e precipita prontamente em pH neutro e alcalino.

É extremamente sensível ao estresse térmico e mecânico (vórtice, oscilação, borbulhamento) e ciclos repetidos de congelamento-degelo.

Ele é sensível à adsorção superficial, portanto, uma proteína transportadora e um recipiente de baixa{0}adsorção devem ser usados.

Manter a bioatividade:

quatro princípios: "dissolução ácida, proteção do transportador, suavidade-a baixas temperaturas e proibição estrita de ciclos de congelamento-degelo ".

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