Introdução ao núcleo de IGF-1 LR3 0.1mg/frasco
Insulina-de ação prolongada-como fator de crescimento-1 análogo|Microdose 0,1mg/frasco
Nome genérico: Análogo de cadeia longa do fator de crescimento 1 semelhante à insulina-
Nome inglês: Insulina-como Fator de Crescimento-1 Long R3 (IGF-1 LR3)
Sequência: polipeptídeo de cadeia-única de 83 aminoácidos, com uma extensão N-terminal de 13 peptídeos, onde o ácido glutâmico na posição 3 é substituído por arginina.
Peso molecular: Aproximadamente 9100 Da
Pureza: Maior ou igual a 97,0% (HPLC)
Contente: 0,1 mg/frasco (100 ug/frasco)
Aparência: Vestígios de pó liofilizado branco
Armazenar: Congelar a -20 graus, proteger da luz e armazenar em local seco.
Guia de uso e armazenamento
Microforma IGF-1 LR3 (0,1mg/frasco):
IGF-1 LR3 0.1mg é um produto de micro-dosagem projetado para estudos in vitro de precisão, particularmente adequado para experimentos celulares em pequena-escala, micro-triagem e exploração de dose preliminar. Em comparação com as formulações convencionais, esta micro-embalagem minimiza os riscos de armazenamento após a abertura, garantindo ingredientes frescos para cada experimento. Sua extensão N-terminal e design de substituição de aminoácidos reduzem significativamente a afinidade por proteínas de ligação, resultando em bioatividade 2 a 3 vezes maior do que o IGF-1 natural e uma meia-vida estendida, tornando-o uma ferramenta altamente sensível para estudar a proliferação, diferenciação e regulação metabólica celular.
Devido à sua dosagem mínima e alta atividade, esta especificação é particularmente adequada para pesquisadores que precisam realizar vários testes de gradiente de concentração, triagem de alto-produto ou estudos em linhagens celulares preciosas. Em comparação com produtos maiores que exigem reembalagens múltiplas, a embalagem individual de 0,1 mg evita a perda de atividade causada por ciclos repetidos de congelamento e descongelamento, garantindo a consistência dos dados experimentais. Em experimentos in vitro que exigem controle preciso de dosagem, como cultura de células-tronco, pesquisa de células neurais e diferenciação de células musculares, esta especificação oferece maior flexibilidade operacional e estabilidade de reagentes.
Aplicações de microdosagem de IGF-1 LR3:
Otimizado para experimentos in vitro de micro-volume e alta-precisão, este produto ativa a via de sinalização downstream do receptor de IGF-1, promovendo significativamente a proliferação celular, a síntese de proteínas e inibindo a apoptose mesmo em baixas concentrações. Esta especificação é adequada para estudos celulares que exigem controle preciso de dosagem e alta reprodutibilidade, especialmente ao manusear amostras preciosas ou conduzir vários experimentos paralelos.
Esta especificação é amplamente utilizada para: ① expansão in vitro e diferenciação direcionada de células-tronco; ② cultura e manutenção funcional de células primárias (como mioblastos, neurônios e condrócitos); ③ controles positivos em plataformas-de triagem de drogas de alto rendimento; ④ adição de fatores de crescimento a sistemas de cultura de micro-células (como placas de 96/384-poços); e ⑤ estudos preliminares de relação dose-resposta dos mecanismos das vias de sinalização celular.
Métodos de uso e armazenamento
1. Reconstituição e preparação:
Solvente recomendado:
Deve ser usado: Solução de ácido acético estéril 0,1M com pH 3,5-4,5
Proteína transportadora: Recomenda-se reconstituir comuma solução de ácido acético pH 4,0 contendo 0,1% de albumina de soro bovino (BSA).
Diluição da solução de trabalho: Diluir pelo menos 100 vezes comPBS estéril ou meio de cultura completo contendo 0,1% de BSA.
Nota importante: Não dissolva diretamente em água pura, soro fisiológico ou PBS neutro, pois isso causará agregação e inativação irreversíveis.
Procedimento de preparação padrão:
Preparação de solvente:
A solução de ácido acético foi tratada utilizando um filtro estéril de 0,22 μm.
O solvente deve ser pré-aquecido a 2-8 graus (não à temperatura ambiente).
Procedimento de micro{0}}reconstituição:
100 μL do solvente recomendado para um frasco de 0,1 mg.
Use uma micropipeta para injetar lentamente a amostra ao longo da lateral do frasco, evitando impacto direto no pó.
Coloque o frasco no gelo egire-o horizontalmente muito lentamentepor 2-3 minutos até que o pó esteja completamente dissolvido.
Girar, vibrar ou soprar são estritamente proibidos.
Concentração final: 1 mg/mL (aproximadamente 0,11 mM) de solução estoque ácida
Diluição gradiente:
Primeira diluição: Tome 1 μL de solução estoque + 999 μL de PBS contendo 0,1% de BSA → 1 ug/mL (aproximadamente 110 nM) de solução intermediária
Segunda diluição: Dilua a solução intermediária até a concentração de trabalho conforme necessário (normalmente 1-100 ng/mL).
A proporção de diluição recomendada é menor ou igual a 100 vezes.
Reembalagem:
A solução estoque ácida foi imediatamente dispensada em 2-5 μL/tubo.
Use tubos PCR de baixa{0}adsorção ou tubos de centrífuga silanizados.
Claramente rotulado: IGF-1 LR3, concentração, data, número do lote
Referência de concentração de trabalho:
Ensaio de proliferação celular: 1-20 ng/mL
Experimento de indução de diferenciação: 10-50 ng/mL
Estudos de vias de sinalização: 0,1-10 ng/mL
Exemplo de preparação e cálculo: Concentração alvo 10 ng/mL, pegue 1 μL de solução intermediária de 1 ug/mL e adicione a 100 μL de meio de cultura.
Pontos-chave a serem observados:
Todo o processo é realizado em baixas temperaturas: os processos de dissolução e diluição são realizados em gelo.
Dissolução ácida: A dissolução inicial deve ser realizada utilizando uma solução de ácido acético pH 4,0.
Dissolução lenta: Somente rotação horizontal lenta é permitida para dissolução.
Uso único: Recomenda-se usar cada frasco de uma só vez após a reconstituição.
Observe a solução: Deve ser claro e transparente após a dissolução; qualquer solução turva deve ser descartada.
Para evitar a adsorção: Use uma solução tampão contendo 0,1% de BSA e consumíveis de baixa{1}}adsorção.
2. Condições de armazenamento:
Pó liofilizado não reconstituído:
Temperatura de armazenamento: -20 graus, prazo de validade 12 meses;-80 graus é recomendado para armazenamento.
À prova de-luz e umidade-: Saco original de papel alumínio, selado com dessecante em seu interior.
Posição fixa: Evite movimentos frequentes para evitar a dispersão do pó.
Solução reconstituída:
Solução estoque ácida: Após reembalagem, armazenar a -80 graus protegido da luz por menos ou igual a 1 mês.
Diluição intermediária: Armazene a -20 graus por menos ou igual a 1 semana
Solução de concentração de trabalho: Prepare fresco e useimediatamente; use dentro de 4 horas.
Congelar-ciclos de descongelamento: Ciclos repetidos de congelamento-degelo são estritamente proibidos; é permitido no máximo um ciclo de congelamento-descongelamento.
Condições de transporte:
deveser usado para transporte.
A embalagem deve incluir um cartão de monitoramento de temperatura.
Tempo de transporte Menor ou igual a 72 horas
3. Controle de estabilidade:
Estabilidade físico-química:
Estável em ambientes ácidos (pH 3,5-4,5)
Sensibilidade à temperatura: Aproximadamente 2-3% de perda de atividade por hora em temperaturas acima de 4 graus.
Sensibilidade mecânica: A oscilação pode levar a mais de 50% de perda de atividade.
Manutenção da bioatividade:
Respeite rigorosamente o princípio de "dissolver em soluções ácidas e utilizar em soluções neutras".
Dispensação única-, ciclo único de congelamento-descongelamento
Descongele rapidamente antes de usar e evite deixar em temperatura ambiente.
Requisitos especiais para operações de micro{0}}volume:
Use uma micropipeta calibrada
Pré-enxágue com uma solução contendo 0,1% de BSA antes de trocar as pontas da pipeta.
Todas as operações são concluídas em uma bancada limpa.
Estabeleça um controle negativo (contendo apenas solvente) para excluir a influência da BSA.
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